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circRNA层析纯化:

HPLC在circRNA纯化中的应用:

高效液相色谱(HPLC)能够基于RNA分子大小、极性等差异,高效快速分离环状RNA(circRNA)及线性RNA杂质(RNA前体、nicked RNA、内含子片段)。HPLC具有高灵敏度、高精密度、工艺可放大等特点。

SEC-HPLC 和 RP-HPLC 均已成功应用于circRNA的纯化。

图示 基于SEC-HPLC (左) 和RP-HPLC (右) 纯化circRNA

青鸟核酸circRNA纯化工艺:

与SEC-HPLC相比,RP-HPLC对circRNA与杂质的分离度更高。

青鸟核酸RNASci平台基于RP-HPLC建立了稳健、可放大的circRNA分析和纯化条件,能有效分离circRNA、线性RNA前体和nicked RNA。基于这一自主开发工艺,我们实现了纯度达90%以上的circRNA的制备。

案例分享:

经青鸟核酸自研HPLC工艺制备得到的circRNA纯度可达90%以上,在体外的翻译活性高于氯化锂沉淀法、磁珠法制备的circRNA样品。