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体外表达活性检测服务:

随着mRNA疫苗的大规模应用,多种类型的编码RNA处于快速发展阶段,包括常规mRNA,自复制RNA(saRNA)和环状RNA(circRNA)等。编码类RNA通过表达目标蛋白发挥生物学功能。

为检测编码RNA的生物学活性、或LNP递送效率,青鸟核酸(RNASci)建立了基于细胞的RNA效力检测方法,包括细胞转染和目标蛋白的鉴定。我们提供裸RNA、RNA-LNP制剂的生物学活性检测服务,包括多类型细胞转染和目标蛋白检测(荧光信号、生物发光信号、ELISA、Western Blotting (WB)等)。

青鸟核酸mRNA体外表达活性检测服务平台支持的细胞类型包括但不限于:293T、HepG2、HeLa、K562、U937、Raw264.7、Jurkat、AU565等。

样品类型 青鸟核酸定制化服务
裸RNA 样品准备(RNA与转染试剂混合)+ 细胞转染+目标蛋白检测
RNA-LNP 细胞转染(RNA-LNP)+目标蛋白检测

检测流程:

案例分享:

案例1:裸mRNA体外表达验证:

我们将几种裸mRNA分别与商业化转染试剂混合,转染至293T细胞。24小时后检测到目标蛋白信号:eGFP(绿色荧光信号)、mCherry(红色荧光信号)、Luciferase(生物发光信号)、新冠病毒SARS-Cov-2刺突蛋白全长(WB特异性条带)。

案例2:RNA-LNP体外表达验证

我们使用一款常规四组分LNP包封编码绿色荧光蛋白(eGFP)的circRNA,将其转染至293T细胞。24小时后检测到绿色荧光信号。

案例3:靶向LNP递送效率评估

使用青鸟核酸研发团队开发的几款细胞靶向LNP(Ab-LNP)包封编码荧光素酶的Luci mRNA,分别转染至目标受体阳性细胞。24小时后,检测到靶向LNP组荧光素酶信号高于常规LNP。

报告基因mRNA 靶向LNP类型 细胞类型及特征
Luci mRNA Anti-CD3 Ab-LNP Jurkat细胞(人T淋巴细胞,高表达CD3)
Anti-HER2 Ab-LNP AU565细胞(乳腺癌细胞,高表达Her2)
Anti-DRAM1 Ab-LNP HepG2细胞(人肝癌细胞,表达DRAM1)