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RNA复制子骨架序列:

自复制RNA(saRNA)的序列组成为:5’非编码序列(UTR)、非结构蛋白1-4(nsp 1-4)编码序列、亚基因组启动子(SGP)、目标蛋白编码序列、3’UTR和polyA尾巴。当前主流的saRNA序列设计思路为:在自复制RNA病毒的基因组基础上,将病毒结构蛋白编码区域替换为目标蛋白编码序列。

RNA复制子骨架序列:

病毒全称 病毒缩写 3Accession Number
委内瑞拉马脑炎病毒 VEEV_TrD L01442
委内瑞拉马脑炎病毒 VEEV_TC83 L01443
托纳特病毒 TONV NC_038675
基孔肯雅病毒 CHIKV NC_004162
O’nyong-nyong病毒 ONNV NC_001512
东部马脑炎病毒 EEEV NC_003899
西方马脑炎病毒 WEEV NC_003908
巴尔马森林病 BFV NC_001786
马亚罗病毒 MAYV NC_003417
罗斯河病毒 RRV NC_001544)
塞姆利基森林病毒 SFV X04129
辛德比斯病毒 SINV MG679378

复制子保守序列解析:

以SFV为例,其基因组序列包含4个保守序列元件(CSE):

1)CSE1:5’ UTR序列,位于病毒基因组的5’端,功能是作为从(‑)链模板合成(+)链的启动子;

2)CSE2:长度为51-nt,位于CSE1下游的nsP1编码序列中,作为从基因组RNA模板的(‑)链合成的启动子;

3)CSE3:长度约24-nt,位于亚基因组启动子(SGP)附近、病毒结构蛋白编码序列的5’端;

4)CSE4:3’端非编码序列,长度为19-nt,位于目的基因编码序列的下游、polyA的上游,作为启动(‑)链合成的核心启动子。